基因組質(zhì)量測量方法 1、技術(shù)方法 基因組DNA質(zhì)量測量主要包括三個方面：基因組DNA片段大小測定、基因組DNA含量測定、基因組DNA含量測定。 采用的技術(shù)方法為：瓊脂糖凝膠電泳，用紫外分光光度計測定基因組DNA堿液的OD值2、試劑瓊脂糖溴化乙錠（終含量0.5μg/ml）6× lye λDNA堿液（50ng/μl） ） 3.儀器電泳儀凝膠成像儀紫外分光光度計四.操作流程1.瓊脂糖凝膠電泳檢查基因組DNA片段大小，制作0.5%（w/v）瓊脂糖凝膠。 依次取1μl、2μlDNA堿溶液，與6×堿溶液混合，上樣。 同時加入 1 μl 或 2 μl λ DNA 堿液。 1-2V/cm電泳大約需要12-16小時。 2.用紫外分光光度計測定基因組DNA堿溶液的OD值，并將DNA堿溶液樣品稀釋，通常稀釋一百倍。 進行 DNA 稀釋并測量 OD260 和 OD280。 根據(jù)=50ng/μl，即50×OD260×稀釋倍數(shù)估算基因組DNA mask的含量。 估計 OD260/OD280 值。 五、注意事項 1、λDNA約為48kb，用于表示提取的DNA的大小。 通常要求提取的DNA大小在50kb以上。 2. 純DNA產(chǎn)物的OD260/OD280值為1.8，純RNA產(chǎn)物的OD260/OD280值為2.0。 如果OD260/OD280值低于1.8，則意味著樣品中可能存在RNA污染； 如果樣品中蛋白質(zhì)或酚污染嚴重，則OD260/OD280值高于上述兩個值。 3、用紫外分光光度計檢測OD值時基因組檢測，讀數(shù)應(yīng)控制在0.01-2之間，即DNA的稀釋倍數(shù)要適當。 4、紫外分光光度法適用于含量較高、純度較高的樣品的定量。 核苷酸在260nm處的吸收特別強基因組檢測，只有高水平蛋白質(zhì)污染的存在才會引起260nm和280nm處吸光度比值的較大變化。 因此，如果A260/A280值高于1.8，則該方法無法準確定量DNA樣本。
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